薄層色譜TLC是將吸附劑、載體或其他活性物質(zhì)均勻涂鋪在平面板（如玻璃板、塑料片、金屬片等）上，形成薄層（常用厚度為0.25毫米左右）后，在此薄層上進(jìn)行層析分離的分析方法。

分析程序　將樣品溶液用毛細(xì)管點(diǎn)在薄層板的一端，置密閉槽中，加入適宜溶劑為流動(dòng)相。由于毛細(xì)管作用，溶劑被吸上，沿板移動(dòng)，并帶動(dòng)樣品中各組分向前移動(dòng)，這個(gè)過(guò)程稱為展開。由于各組分性質(zhì)不同，移動(dòng)距離不同，展開一定距離后，即得互相分離的組分斑點(diǎn)。可用適當(dāng)方法使各組分在板上顯示其位置，如組分本身有顏色，即可直接觀察，否則可噴顯色試劑或在紫外燈下觀察熒光等辦法確定斑點(diǎn)位置。

薄層色譜TLC操作

⑴制板（以硅膠板為例）

選擇合適的玻璃板（經(jīng)常使用顯微鏡上的載玻片），依次用水和乙醇洗凈，晾干。取適量薄層色譜用的硅膠，加適量蒸餾水調(diào)成糊。調(diào)制時(shí)慢慢攪拌，勿使產(chǎn)生氣泡。將糊倒在玻璃板上，搖動(dòng)攤平，晾干。使用前放入烘箱內(nèi)，在105-115oC左右烘干40-50分鐘。冷卻后使用。

⑵點(diǎn)樣

將試樣用zui少量展開劑溶解，用毛細(xì)管蘸取試樣溶液，在薄層板上點(diǎn)樣。在樣點(diǎn)上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細(xì)線。薄層色譜板載樣量有限，勿使點(diǎn)樣量過(guò)多。

⑶展開

吹干樣點(diǎn)，豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿，但切勿接觸到樣點(diǎn)。蓋上蓋子，展開。待展開劑上行到一定高度（由試驗(yàn)確定適當(dāng)?shù)恼归_高度），取出薄層板，再畫出展開劑的前沿線。

⑷顯色，計(jì)算Rf值

揮發(fā)干展開劑，選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動(dòng)距離，計(jì)算各組分的相對(duì)移動(dòng)值。